Développements en microscopie optique pour le vivant : mesures de mobilité et de forces

Orateur : Soutenance d'HDR d'Irène WANG

La microscopie optique est largement utilisée pour visualiser les structures qui composent le vivant. Je présenterai un ensemble de techniques de microscopie de fluorescence qui visent à obtenir, non des images, mais des informations quantitatives (densité absolue) et fonctionnelles (interaction, agrégation ?), essentielles pour comprendre les processus cellulaires. Ces méthodes sont basées sur l’analyse des fluctuations temporelles causées par les molécules qui diffusent à travers un petit volume d’observation. Je montrerai quelques pistes pour donner à ces mesures à une dimension spatiale : le façonnage de front d’onde pour créer de multiples points d’excitation couplé à une matrice de détecteurs et les méthodes de corrélation d’images. Nous avons appliqué ces techniques à l’étude de la mécanosensibilité cellulaire. En contrôlant la géométrie des cellules, nous montrons qu’il est possible de localiser les contraintes qu’elles exercent sur leur substrat et que ce niveau de contrainte est corrélé à la mobilité des protéines impliquées dans l’adhérence cellulaire. Finalement, je discuterai de l’une des limites actuelles des méthode de fluctuations de fluorescence qui est leur extrême sensibilité aux aberrations optiques induites par l’échantillon lui-même, ces dernières pouvant créer des biais importants dans les mesures. Une approche d’optique adaptative utilisant un miroir déformable a été mise en ?uvre pour corriger ces aberrations et fiabiliser les mesures de fluctuations de fluorescence dans les échantillons épais.

Télécharger dans mon agenda