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4Pi-STORM and the 3D architecture of the Nuclear Pore Complex

Vendredi 7 février 11:00 - Duree : 1 heure
Lieu : Salle des séminaires de l’IBS - 71, avenue des Martyrs - Grenoble

Orateur : Mark BATES (Department of NanoBiophotonics, Max Planck Institute for Biophysical Chemistry, Göttingen, Germany)

Super-resolution fluorescence microscopy techniques such as STORM enable the visualization and quantification of sub-cellular structures at the nanometer scale. Interferometric detection, in particular, yields the highest possible localization precision along the Z dimension, allowing for fluorescence microscopy datasets with isotropic 3D image resolution of 10 nm or better. At this level of detail, it becomes possible to visualize the substructure of protein complexes, and we have applied this approach to study Nuclear Pore Complex (NPC) organization. The combination of genetically engineered cell lines, small fluorescent tags, super-resolution 3D imaging, and particle alignment methods designed for localization microscopy data, allowed us to obtain multicolor reconstructions of NPCs which may be directly compared with cryo-electron microscopy structures. Our approach allows for the alignment and visualization of an arbitrary number of distinct structural elements in the NPC, and these results represent the first example of multicolor 3D light microscopy of a single protein complex at 10 nm resolution. The specificity and high contrast of the fluorescence data allows new insights into NPC biology which are not accessible by other methods, and our work represents a further step in the development of light microscopy as a tool for structural biology studies.

Contact : ibs.seminaires@ibs.fr

Discipline évènement : (Biologie / Chimie)
Entité organisatrice : (IBS)
Nature évènement : (Séminaire)
Evènement répétitif : (Séminaire IBS)
Site de l'évènement : Polygone scientifique

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